感染齿龈内阿米巴的牙周炎患者唾液中酶和MDA的含量与作用

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摘　要：目的　探讨酶类和氧自由基在齿龈内阿米巴(Entamoeba gingivalis,Eg)致牙周炎中的作用。方法　以自然流滴法分别收集感染Eg的牙周炎患者、无感染Eg的牙周炎患者及健康对照者三组的唾液，用生化方法检测唾液中的超氧化物歧化酶(SOD)、酸性磷酸酶(ACP)、过氧化氢酶(CAT)活性和过氧化脂质产物丙二醛(MDA)的含量。结果　有、无感染Eg的牙周炎两组的SOD活性均低于正常组(P<0.05)；感染Eg的牙周炎组的ACP活性与MDA含量均高于无感染Eg的牙周炎组和正常组(P<0.05,P<0.01)；CAT活性在三组间无显著性差别(P>0.05)。结论　ACP和氧自由基破坏细胞膜及膜性细胞器，使宿主齿龈局部的上皮细胞受损为Eg致牙周炎的致病机制之一。

关键词：齿龈内阿米巴　　牙周炎　　酶　　MDA　　唾液

　　齿龈内阿米巴(Entamoeba gingivalis,Eg)寄生于人体口腔的牙龈组织间隙，以往许多学者认为它是一种非致病的共栖原虫，然而流行病学调查显示牙周病患者Eg的感染率显著高于健康人群，推测Eg与牙周病有关〔1、2〕，本文通过动物试验，证明Eg可致牙周脓肿〔3〕，其致病机制还不了解，现已知自由基和某些酶类对组织细胞有损伤作用，与许多疾病有关，本研究通过对感染Eg的牙周炎患者唾液中酶和MDA含量的检测，研究Eg、酶及自由基与牙周炎之间的关系，以探讨Eg的致病机制。

材料和方法

　　1.研究对象

　　牙周炎患者：从附属口腔医院选择牙周炎病人22例

　　本课题由福建省科委提供资助(编号95-J-33)(其中男9例，女13例，年龄25～37岁)，均用消毒的牙科探针取四个牙位的牙周袋或龈沟内容物，进行生理盐水直接涂片，全片观察，将牙周炎患者分为感染Eg的牙周炎组(13例)与无感染Eg的牙周炎组(9例)。正常对照组：选自本校教师经检查无Eg感染且无任何口腔疾患者9例，其中男3例，女6例，年龄27～38岁。所有的研究对象均无系统性疾病，3个月内未服用抗生素、免疫抑制剂和抗氧化剂(如VitA、VitC、VitE)。

　　2、唾液收集与保存：用自然流滴法分别收集每个研究对象的唾液4～5ml于干净的瓶中并封盖。置－20℃冰箱保存待用。

　　3、检测指标及测定方法：蛋白质检测按Lowry法〔4〕，超氧化物歧化酶(Cu-Zn SOD)、过氧化氢酶(CAT)的活力测定方法同前〔5〕，酸性磷酸酶(ACP)测定方法同碱性磷酸酶(AKP)〔5〕，脂质过氧化物(LPO)测定采用硫代巴比妥酸法，以丙二醛(MDA)含量表示〔6〕。具体步骤及计算方法见上述参考文献。

结　　果

　　三组研究对象唾液中的蛋白质、酶类及脂质过氧化物含量及比较(表1)。

表1　有、无Eg感染的牙周炎患者与正常人唾液中蛋白质、酶类及MDA的含量比较

 检测指标Eg阳性牙周炎组*Eg阴性牙周炎组**正常组***P蛋白质(mg/ml)3.50±1.343.02±0.753.10±1.03>0.05SOD(U/mgpr)928.13±161.88961.97±104.881128.80±144.39<0.05CAT(K/mgpr)204.95±64.84189.12±87.75150.68±38.40>0.05ACP(U/100ml)792.91±191.35621.70±215.78540.52±123.69<0.05MDA(μM/L)5.22±1.463.62±1.092.79±0.05<0.05

　　*n=13　　　**n=9　　　***n=9

　　从表1可见三组间各项检测指标分别经方差分析的结果：蛋白质、CAT的含量均无显著差别(P>0.05)；而SOD、ACP、MDA的含量有显著差异(P<0.05)，进一步的两两比较(用q检验)结果见表2～4。

　　表2　有、无Eg感染的牙周炎患者与正常人唾液中

SOD(U/mgpr)的活性比较