复方苔藓片抗氧化损伤的组织学观察

　　提　要　目的　探讨复方苔藓片是否具有体内抗自由基损伤的作用。方法　将24只金黄仓鼠分为三组，Ⅰ、Ⅱ组每日给臭氧吸入，第Ⅱ组同时每日灌喂复方苔藓片，共40天，Ⅲ组为空白对照，实验结束时，取动物颊粘膜、肺、肝进行常规病理学评价。结果　臭氧吸入未引起仓鼠颊粘膜损伤，但肺和肝损伤明显，喂复方苔藓片的动物则损伤减轻，提示该药可能具有减轻自由基损伤的功能。

　　关键词　抗氧化作用　　复方苔藓片　　体内实验

　　活血化瘀中药复方苔藓片治疗口腔扁平苔藓的疗效已得到肯定〔1〕，对其机制的研究发现有改善微循环、纠正血液流变异常及体外抗自由基的作用〔2、3〕。本实验通过给金黄仓鼠短期内大量吸入臭氧（O3）造成氧化损伤，从形态学方面观察该药是否具有体内抗氧化损伤的作用。

材料和方法

　　1. 实验动物及分组

　　普通级封闭群金黄仓鼠24只（成都生物制品研究所提供），2月龄，70～80克，雌雄各半，随机分为三组，每组8只。Ⅰ组为O3组，Ⅱ组为O3+复方苔藓片组，Ⅲ组为空白对照组，普通级环境分笼饲养，温度18～24℃，饲以小鼠颗粒料（华西医大实验动物中心提供），不饮水，喂新鲜蔬菜补充水份。

　　2. 实验药物

　　复方苔藓片：主要由丹参、赤芍、鸡血藤、川芎等组成。由广汉制药厂制成片剂，批号920617，每片0.3克，研成粉末，蒸馏水，配成混悬液（每片1ml)，用时摇匀。

　　3. 实验过程

　　所有动物常规饲养20天，第21天起Ⅰ和Ⅱ组动物放入特制的臭氧箱内，每天4小时，箱内装有15瓦紫外线灯（O3浓度为0.8ppm），Ⅲ组不处理。此外，Ⅱ组动物每天灌喂复方苔藓片悬液1ml。观察记录各组动物毛色，进食，定期称重。第61天处死全部动物，切取颊粘膜、肺、肝，肉眼检查病变情况，然后用10％福尔马林固定，石蜡包埋。4μm切片，HE染色进行组织学评价。

结　果

　　一般情况

　　到实验结束时，三组动物毛色、活动，进食情况无明显差异。Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组平均体重分别为94.30克、95.10克和95.70克。颊粘膜肉眼观无异常。Ⅱ组动物肝、肺表面充血；Ⅲ组则充血不明显。

　　组织学观察

　　1. 颊粘膜上皮完整，无炎性细胞浸润，三组动物无差异。

　　2. 肺脏：正常（Ⅲ组）肺组织间隔完整，血管无充血。Ⅰ组见大量肺泡破裂，间隔增厚，甚至呈纤维瘤样改变，毛细血管扩张，小支气管部分上皮脱落。周围有大量炎性细胞增生，呈团块状，似淋巴小结样。Ⅱ组仅见少量肺泡间隔断裂，增厚和毛细血管扩张，小支气管周围无明显病变。

　　3. 肝脏：正常肝脏小叶结构完整，几无炎性细胞浸润。Ⅰ组见散在炎性细胞浸润灶，灶内多为10～20个细胞，最多达40个，肝小叶结构基本正常。Ⅱ组与Ⅰ组相似，但炎性细胞灶数量明显减少。Ⅰ组10×10倍视野内可见8～10个炎性浸润灶，Ⅱ组仅见3～4个炎性浸润灶。

讨　论

　　正常情况下，动物体内自由基的产生及清除处于动态平衡。给动物短期内大量吸入O3，可在体内产生大量的自由基，当机体不能完全清除时，易造成氧化损伤蛋白质，酶或DNA，引起组织和器官损害,损害的程度与自由基浓度和作用时间有关。增强对自由基的清除能力，可降低损害程度〔4〕。有人给大鼠短期内连续吸入O3，引起类似衰老动物的改变，用于与衰老有关的实验研究〔5〕。

　　复方苔鲜片的主要成分为丹参，赤芍和川芎等，临床上主要用于治疗瘀血病症口腔扁平苔藓和白斑，具有较好疗效，但其作用机制不清楚。已有研究表明丹参、赤芍和川芎有清除自由基的作用〔6〕。我们过去的研究证实该制剂有体外清除自由基的作用，本实验给金黄地鼠短期吸入O3，产生大量自由基，引起肺和肝脏的损害、喂复方苔藓片则使肺和肝脏损害减轻，表明该药具有体内抗氧化损伤的作用，并可能是其临床疗效机制之一。

段开文（650032昆明，昆明医学院第一附属医院口腔内科）