应用多糖及胶原蛋白复合生物膜做小型猪牙直接盖髓基础研究初探

〔摘要〕　目的：研究应用多糖(以氨基多糖为主)及胶原蛋白复合生物膜对小型猪牙行直接盖髓术的作用。方法：用多糖及胶原蛋白复合生物膜做小型猪牙的直接盖髓术并与氢氧化钙对照。分别于术后2、4、12 周、6 个月将小型猪快速处死，本文是随机抽样不同时期的4 个对照牙经固定，超声快速脱钙做组织切片，在光镜下观察。结果：4 个术后不同时期的牙在穿髓孔处均有不同程度的修复性牙本质形成。周边造牙本质细胞排列整齐，牙髓无炎症及变性，根髓及牙周组织正常，最终形成牙本质桥将穿髓孔封闭使牙髓保存了活力。结论：实验结果证明了含有多糖及胶原蛋白复合生物膜对小型猪牙有良好的直接盖髓作用，从而推动实验深入进行。

关键词　多糖类；胶原；雏型猪；修复性牙本质

　　目前国内外很多有关多糖(以氨基多糖醛)及胶原蛋白等各种生长因子的生物制剂在医药领域中广泛研究和应用的报道［1～4］。胶原及其他生物材料。氨基多糖是天然高分子物质，可以和蛋白、碳酸钙紧密结合成为一种络合体［7］，有调节体液平衡，抑制细菌和寄生虫作用，促进伤口愈合，有增强免疫力，促进细胞再生功能，有良好的生物学可溶性，已在外科应用［4,5］。胶原有促进成纤维细胞增殖，诱导硬组织桥形成等作用［1,6］。本实验用含有氨基多糖及胶原蛋白的生物膜作为小型猪牙的直接盖髓剂，取得了意想不到的效果。

1　材料和方法

1.1 本实验用小型猪由北京农业大学实验动物研究所提供，年龄在生后半年至1 年，实验期在我院动物室用标准混合饲料笼养，实验前观察1～2 周待生活习惯稳定、无全身疾病时作为待实验动物。实验当日早晨禁食，实验时用复方氯胺酮注射液按每10 kg体重用1 ml的用量从猪耳后做肌肉注射麻醉，待麻醉后侧卧体位，剪去口周棕毛，用水冲洗，用25g/L 碘酒及体积分数为 75%酒精消毒，用木塞将口张开，做口内消毒并放置吸唾器。全实验过程均无菌操作。

1.2 实验用多糖胶原蛋白复合生物膜(以下简称生物膜)经制作、除杂质、干燥、消毒，常温保存待用。检查小型猪口腔内牙齿状况为乳牙及恒牙混合牙列，选择无龋坏、无磨耗、牙周正常的牙，用消毒的高速涡轮机钻将小型猪牙开髓，如果出血多，注意止血，穿髓孔大小约0.5～1 mm，用生物膜做直接盖髓，少量氧化锌丁香油糊剂及水门汀垫底后做银汞合金充填；对照组用无菌氢氧化钙粉剂加少量无菌生理盐水调合后做直接盖髓，同样用氧化锌丁香油糊剂及水门汀垫底，银汞合金充填。待小型猪麻醉苏醒后放入动物室笼养。术后观察实验动物进食及日常活动无异常表现，分别在手术后2、4、12 周、6 个月时用心脏直接穿刺放血将小型猪快速处死。

1.3 立即将处死后小型猪实验牙拔下，拔时注意不可拔断，以免牙髓被脱出而移位，放入体积分数为10% 福尔马林液中固定。观察拔下的实验牙均无牙体变色，牙周正常，无瘘管，说明牙髓是活的。

1.4 随机抽取不同盖髓期的4个牙，为2周(左上第一磨牙)、4周(左上第二前磨牙)、12周

(左上第二磨牙)、6个月(左上第一磨牙)及氢氧化钙对照的4周(左上第二磨牙)。用快速超声脱钙后，脱水、包埋、切片、HE 染色，在光镜下观察并用显微摄影作形态学分析。

2　结　果

2.12 周组织切片　见牙髓腔毛细血管充血，纤维细胞增生，周边成牙本质细胞排列整齐，穿髓孔处可见明显的新生粉染均质物质为牙本质。冠髓及根髓组织正常。

2.24 周组织切片　牙髓腔有毛血管扩张，充血明显，纤维细胞增生，周边成牙本质细胞排列整齐，穿髓孔处可见已形成的牙本质团块，成弧形排列，团块周边有丰富的成牙本质细胞。冠髓及根髓组织正常。

2.312 周组织切片　牙髓腔内毛细血管扩张，纤维细胞增生，周边成牙本质细胞排列整齐，穿髓孔下方可见新生的牙本质，已有牙本质小管形成，并见大部分不规则的钙化物形成。冠髓及根髓组织正常。