正常女性口腔粘膜组织中雌孕激素受体检测的意义
提 要 目的 通过对正常女性口腔粘膜组织中雌孕激素受体的检测，阐明雌孕激素受体在口腔粘膜组织中存在的意义，为探讨与其相关的口腔粘膜病提供理论依据。材料与方法 应用ABC法对10例健康女性黄体期口腔粘膜作ER与PR的检测。结果 10例口腔粘膜均表现为正常的组织象。其中，7例雌激素受体阳性，8例孕激素受体阳性。结论 口腔粘膜亦是性激素的靶组织之一。
关键词 口腔粘膜 雌激素受体 孕激素受体口腔粘膜可能亦是性激素的靶器官之一〔1、2〕。为此，我们应用ABC技术，对正常女性口腔粘膜中的ER及PR予以检测，旨在探讨ER、PR与正常女性口腔粘膜的关系，同时，为探索ER、PR和某些与月经周期密切相关的口腔粘膜病如复发性阿弗它溃疡及口腔扁平苔藓等的关系提供理论依据。
材料与方法
标本选择
10例已育健康女性，年龄28～42岁，平均年龄34.5岁；月经周期规则；受检前1月禁用任何激素类药物。
方法
1. 排卵期预测与标本采集
排卵期的预测采用基础体温及促黄体生成素棒测定相结合的方法。在排卵后的第三天作口腔粘膜活检，其中，左颊5例，右颊5例。标本作常规病理检查。
2. ER、PR的ABC检测〔3〕
2.1 主要试剂
ER、PR检测试剂盒购自Vectastain公司，0.05mol/L pH7.8 TBS、1％多聚甲醛溶液、雌二醇及孕酮溶液、DAB显色液均自行配制。
2.2 操作步骤
①二甲苯脱蜡（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ各10min）,乙醇水化（100％、90％、80％、70％各15s），TBS漂洗2次，每次3min。
②0.05％胰蛋白酶37℃孵育15min，TBS漂洗2次，每次3min。
③3％H2O2-甲醇溶液处理15min，TBS漂洗2次，每次3min。
④阻断血清处理10min，TBS洗3次，每次3min。
⑤雌二醇与孕酮溶液37℃孵育30min，TBS洗3次，每次3min。
⑥1％多聚甲醛固定5min，TBS洗3次，每次3min。
⑦兔抗雌二醇抗血清和兔抗孕酮抗血清37℃孵育1h，TBS洗3次，每次3min。
⑧生物素标记的抗免疫球蛋白抗体37℃孵育30min，TBS洗3次，每次3min。
⑨ABC在37℃条件下处理1h，TBS洗3次，每次3min。
10DAB显色2～7min，蒸馏水漂洗3次，每次3min，透明，封片，光学显微镜观察。
2.3 对照组的设定
阳性对照：10例排卵期后3天的子宫内膜标本作阳性对照。
阴性对照：操作步骤中用双蒸水代替兔抗雌二醇、兔抗孕酮抗血清，其余条件同实验组，作为阴性空白对照。
2.4 结果的判断
阳性：在胞核及胞浆中见棕黄色颗粒沉淀。
阴性：在胞核及胞浆中未见棕黄色颗粒沉淀。结 果
1. 10例正常颊粘膜HE染色表现为正常的组织象；10例正常对照组黄体期子宫内膜亦呈现正常的分泌期组织象。
2. ER、PR检测结果
2.1 在10例正常颊粘膜中ER阳性7例，阴性3例，阳性染色图象表现为颊粘膜上皮细胞的胞浆与胞核中见棕黄色颗粒沉淀（图1）；对照组黄体期子宫内膜ER均为阳性。
2.2 在10例正常颊粘膜中PR阳性8例，阴性2例，阳性染色图象类似于ER，也表现为在颊粘膜上皮细胞的胞浆与胞核中见棕黄色颗粒沉淀（图2）；对照组黄体期子宫内膜PR检测亦均为阳性。
图1 雌激素受体阳性的ABC染色图象（×40）
图2 孕激素受体阳性的ABC染色图象（×40）讨 论
随着医学科学的迅猛发展，灵敏检测技术的不断涌现及人们对生理与疾病认识的进一步加深，人们发现性激素受体不仅存在于睾丸、卵巢、子宫、乳腺、前列腺等传统的靶组织，也可存在于肝脏等传统靶组织以外的组织〔4〕，而口腔粘膜性激素受体的研究亦是此领域中不可分割且较为活跃的一个部分。本研究应用ABC法对10例女性正常口腔粘膜进行ER和PR的检测，发现ER阳性7例，PR阳性8例，与Forabosco对正常育龄期妇女的ER、PR检测结果一致〔5〕。Forabosco同时对10例具有口腔不适的绝经期妇女作ER与PR检测，发现对ER、PR阳性的口腔不适患者进行雌激素、安宫黄体酮替代治疗后，症状迅速缓解，治疗效果的出现与外源激素跟口腔粘膜中ER、PR结合后所致的生物效应有关。在本组资料中，3例口腔粘膜ER阴性与2例PR阴性，可能与该组织中ER、PR的浓度低于检测阈值有关。
