仓鼠颊囊粘膜实验性白斑形成与上皮局部免疫关系的研究
摘 要：目的 探索以LC，LYC，MC为主构成的上皮局部免疫系统在白斑形成及发展中的作用。方法 采用ATP酶染法标记LC，A-醋酸苯酯六偶氯付品红法标记LYC及MC，以求了解仓鼠白斑形成过程中，上皮局部免疫状态之变化，从而为探讨人类白斑提供一定的帮助。结果 实验表明以LC为主的局部上皮局部免疫系统在白斑形成中有着明显而密切的反应及变化。结论 上皮局部免疫系统是由LC，LYC，MC共同参与，实际存在的局部系统，这一系统在防止上皮癌前病变的发展有着十分重要的作用，在这系统中，LC处于最为敏感的地位。
关键词：白斑 朗格罕氏细胞 上皮局部免疫系统本文拟用仓鼠颊囊实验性白斑为模型，采用ATP酶染法标记LC（郎格罕氏细胞），A-醋酸苯酯卞偶氯付品红法标记LYC（淋巴细胞）与MC（巨噬细胞），以求了解仓鼠白斑形成的过程中，上皮局部免疫状态之变化，从而为探讨人类白斑提供一定的帮助。
材料与方法
80只雄性，80～100克，鼠龄为6～7周的金地鼠为试验鼠，动物购自武汉生物制品研究所，饲养于塑料金属鼠笼，喂以湖北医科大动物房生产的颗粒饲料以及市场上所购之新鲜蔬菜。
试验鼠分为六组，处理方法如下：
第1组：空白对照组，不作任何处理，16只鼠。
第2组：丙酮对照组，每周双侧颊囊粘膜涂擦丙酮三次，隔日一次，16只鼠。
第3组：DMBA一次处理组。12只鼠。双侧颊囊粘膜仅涂一次DMBA。
第4组：DMBA三次处理组。12只鼠。双侧颊囊粘膜涂擦DMBA三次，隔日一次。
第5组：DMBA六次处理组。12只鼠，双侧颊囊粘膜涂擦DMBS六次，隔日一次，每周三次。
第6组：DMBA十二次处理组，12只鼠。每周三次，双侧颊囊涂擦，直至粘膜白斑明显形成。
所用DMBA为7.10二甲基苯并蒽的50％的丙酮溶液，涂擦工具为小号美术排笔，涂擦部位为颊囊粘膜外侧前三角区。
所有四组作DMBA处理的试验鼠，在最后一次涂擦DMBA后的四个半小时，24小时，48小时，一周，分别取三只处死，每一DMBA试验组处死结束时，分别取4只空白对照组鼠，丙酮对照组鼠处死，以作对照，处死后的鼠，取下颊囊，剪下外侧前三角区粘膜及粘膜下组织。
LC以阳性ATP酶着色细胞，LYC，MC以阳性非特异性酯酶反应着色细胞计数与定量。数学的统计学检验采用t值检验，P＜0.05被认为有显著意义。结 果
仓鼠颊囊粘膜经一次DMBA涂擦处理后，组织切片上即可见有较明显变化（图1）。角层增厚，上皮间隙增宽，上皮下炎细胞轻微浸润，上皮层偶有破坏，见有小的溃疡区。经三次DMBA处理后，肉眼可见粘膜表面明显炎症现象，充血明显，并不同程度出现溃烂、坏死，组织切片可见上皮水肿明显，上皮及上皮下炎细胞浸润显著，上皮细胞出现坏死变性，上皮呈多处断裂（图2）。经六次DMBA涂擦处理后，肉眼可见粘膜炎症明显消退，溃烂也基本愈合，假膜消失，增厚的上皮使粘膜的透明度大大降低，已有一块灰白色的薄层自粘膜表面微微隆起，镜下见上皮增厚明显，棘层增加，基底细胞增厚出现某种程度的排列紊乱，并有向下延伸之趋势，上皮及上皮下炎细胞浸润减轻（图3），当处理至九次时，颊粘膜的灰白色隆起更为明显，斑块周围无明显炎症现象，继续处理至十二次时，白色斑块未见继续增大增厚，镜下部分标本已呈轻度非典型增生象，上皮过度不全角化，上皮钉肥大向下延伸，基细胞核深染，排列呈一定程度的紊乱（图4）。上皮铺片LC的ATP酶着色清晰典型，树枝状结构明显可辨，胞体胞枝一清二楚（图5）。经DMBA一次处理的颊囊粘膜，与空白及丙酮处理对照比较，LC在处理后4.5小时至24小时无多大数量变化，48小时至一周有了一定数量的增加，但无统计学意义（图6）（表1）。经三次DMBA处理后，4.5小时及24小时LC数较丙酮对照组及空白对照组有一定增加（P＜0.05），48小时后不仅较丙酮处理组及空白对照组，而且较自身组4.5小时及24小时阶段有显著的增加（P＜0.001），这种增加一周后继续存在。同时见LC染色加深（表2，图7）。经六次DMBA处理48小时后，LC数较三次处理阶段有明显减少（P＜0.05），一周后继续有所减少，但仍稍高于对照组（表3、4）。经十二次DMBA处理后，4.5小时LC数即见明显减少（P＜0.05），48小时后减少更明显。较丙酮及空白对照组亦有显著下降（P＜0.05），LC染色亦较淡，树枝状结构模糊，胞枝残缺（图8，表5）。MC在丙酮对照组及空白对照组中未见阳性反应。DMBA首次处理后，即见上皮内及上皮下出现非特异酯酶染色强阳性反应的MC，反应产物棕红色，弥漫于整个胞浆，有的浓染，甚至掩盖胞核。三次处理后，MC数达高峰值，至六次处理后，上皮内LC呈下降，十二次处理后，上皮内明显减少（P＜0.01），上皮下MC亦有下降，淋巴细胞在首次DMBA处理后上皮内及上皮下密度即见增加，非特异酯酶阳性反应细胞呈棕红色，体积小，因采用冰冻切片，未见颗粒，胞浆呈弥漫性反应，滴状阳性。三次DMBA处理后密度继续增加，六次处理后呈下降趋势，下降以上皮内为主，十二次处理后上皮内及上皮下均下降较多。
