口腔粘膜下纤维性变中成纤维细胞的超微结构观察

摘　要：为探讨口腔粘膜下纤维性变(OSF)中胶原增生的机制,透射电镜下对成纤维细胞分类计数，结果表明合成胶原功能最旺盛的成胶原细胞在病变早期、中期增多，降解胶原能力最强的破纤维细胞在病变中期、晚期减少，其差异均有显著性。提示OSF中胶原纤维的堆积在早期主要为合成的增多，中期既有合成的增多，也有降解的减少，而晚期则主要为胶原降解不足所致。

关键词：口腔粘膜下纤维性变　　成纤维细胞　超微结构

　　口腔粘膜下纤维性变(oral submucous fibrosis,OSF)是一种慢性疾病，并成为癌前状态〔1〕。对于OSF中与胶原代谢密切相关的细胞--成纤维细胞(fibroblast,Fb)的研究，目前多集中于体外细胞培养法〔2，3〕，而对病变组织中Fb的原位研究尚较缺乏。本文通过研究OSF中Fb的超微结构，探讨OSF的发病机制。

材料和方法

　　1.病变组来源于湖南医科大学口腔系粘膜病专科门诊所收集的OSF病人颊部病变组织标本，对照组5例取自无槟榔、烟、酒嗜好，身体健康的志愿者相应部位颊粘膜。标本切下后均一分为二，一份用10％中性福尔马林固定，用于光镜检查，另一份用2.5％戊二醛固定，用于电镜观察。

　　2.经福尔马标固定的标本按常规石蜡包埋切片，厚4μm，进行HE染色显示一般结构，请病理学专家确诊，并将病变组织按病理学标准〔1〕进行分期。

　　3.从已确诊的OSF病变标本中选择早、中、晚期各5例，加上正常对照5例共20例标本，将其相应的经戊二醛预固定的标本按常规透射电镜制样，每个标本制两个铜网，HITACHI-H-600(日本)透射电镜观察。

　　4.Fb分类计数：按张树欣等〔4〕的区分标准，电镜下对OSF每期及正常对照分别随机计100个Fb中成胶原细胞及破纤维细胞的细胞数。

结　　果

　　1.OSF各期均可见到广泛分布的Fb，其胞浆内富含粗面内质网(rough endoplasmic reticula,RER)、线粒体(mito chondria,Mi)。 RER池明显扩张，部分呈大泡状，外有膜包裹，膜上有颗粒状核糖体，池内有絮状物。Mi则呈空泡性变，体积增大，密度降低，嵴状结构紊乱或消失，但双层膜仍清晰可见。大部分Fb中溶酶体少见，未见到具周期性横纹的胶原原纤维被Fb吞噬的现象。早期和中期的病变组织内可见呈片状增生的Fb，三五成群，紧密相邻，甚至排列成行，似上皮细胞。晚期Fb 量则明显减少。

　　在OSF中、晚期胶原纤维束间可见片状高密度区域，其电子密度似胞浆，内有残余的细胞器膜结构，无细胞核、细胞膜，周围有无周期性横纹的胶原纤维(图1)。

图1　胶原纤维(f)间的片状高密度区，内有残余的细胞器膜结构(m)。×10000

　　2.Fb分类计数

　　OSF各期均可见到处于不同发育阶段的Fb，包括少分化成纤维细胞、幼成纤维细胞、成胶原细胞、肌成纤维细胞、破纤维细胞及纤维细胞六种类型。成胶原细胞呈梭形，细胞边缘有微绒毛，核呈卵圆形或杆状，胞浆内RER发达，且RER池明显扩张(图2)。破纤维细胞呈梭形，表面突起较多，核较小，常偏于一侧，胞浆内含大量各级溶酶体和吞噬泡，RER不发达(图3)。计数结果显示，成胶原细胞在OSF早期、中期增多，晚期较前两期减少，而与正常无差别；破纤维细胞在OSF中期、晚期较正常及早期减少，其余各期无差别。(表1、2)。

表1　两种Fb的计数

 Fb正常(％)OSF(％)早期中期晚期成胶原细胞17322917破纤维细胞181020

表2　两种Fb各组间两两比较的P值(x2检验)

　　图2　成胶原细胞，示增生、扩张的RER(R)。×15000